[FVET] EVALUACIÓN DEL EFECTO DE LA CRIOPRESERVACIÓN SOBRE EL POTENCIAL DE MULTIDIFERENCIACIÓN Y CRECIMIENTO IN VITRO DE LAS CÉLULAS MADRE MESENQUIMALES DERIVADAS DE TEJIDO ADIPOSO EQUINO

Las células madre mesenquimales (CMM) se utilizan cada vez más en medicina regenerativa. Normalmente se utiliza como suplemento el suero fetal bovino (SFB), siendo un producto comercial costoso, afecta el bienestar animal (sufrimiento del feto al extraer el suero), contiene proteínas xenogénicas, y el riesgo de transmitir patógenos de una especie a otra. El objetivo de este trabajo fue evaluar la sustitución del SFB por el lisado plaquetario (LP) equino en el medio de cultivo de las CMM. El aislamiento y expansión de células se realizó a partir de tejido adiposo (TA) de cuatro equinos adultos, se mantuvieron los cultivos celulares con dos medios de crecimiento distintos, suplementados SFB o LP equino, siendo incubados a 37 ºC con 5% de CO2. Se realizó el recuento de células y el tiempo en que los cultivos alcanzaron una confluencia de 80-90%. Fue posible cultivar y expandir CMM-TA con ambos suplementos. Se observaron diferencias significativas en el recuento celular en algunos pasajes (a favor del MC-LP en el caso de los P2(p=0,001) y P5(p=0,01)). En el caso del P3 (p=0,02) se vio mayor recuento con el MC-SFB.  El tiempo de crecimiento de las células fue similar para la mayoría de los pasajes, pero en los P2-P3 se vieron tendencias (p=0,08) indicando menor tiempo para llegar al 80-90% de confluencia de las células cultivadas con MC-LP.  Las CMM-TA cultivadas con ambos medios fueron caracterizadas mostrando la formación de colonias fibroblásticas y diferenciándose in vitro al linaje cartilaginoso. En conclusión, las CMM-TA equinas pueden ser expandidas in vitro con el sustituto de LP, sin perder sus características de célula madre. Se observaron diferencias no conclusivas, en su capacidad proliferativa, por lo que sería necesario realizar nuevas investigaciones.